服务简介

    诱导多潜能干细胞是将四个转录能因子Oct4，Sox2, Klf4, c-Myc 导入终末分化细胞，从而将成体细胞重新编程转化为类似胚胎干细胞状态的多潜能细胞，叫做诱导多潜能干细胞。 诱导多潜能干细胞具有和胚胎干细胞非常相似的生物学特性，由于胚胎干细胞的独特生物学性质，为研究细胞发育分化调控、疾病模型、药物筛选、临床治疗等提供了有效的研究平台。

服务内容：

1.诱导多潜能干细胞建系（逆转录病毒，mRNA, episomal)

2.诱导多潜能干细胞标志物免疫染色（Nanog, Oct4, Sox2, SSEA3, SSEA4, TRA1-60, TRA1-81)

3.诱导多潜能干细胞体外分化能力鉴定（EB分化，三胚层标志物染色）

4.体内分化能力鉴定（免疫缺陷小鼠注射，畸胎瘤形成，免疫组化染色）

5.染色体核型鉴定，G带

 

原代细胞培养

服务简介:

  将动物各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法处理，分散成单细胞，在合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。

服务内容:

  原代细胞分离培养与鉴定(鉴定可提供流式细胞仪检测、免疫细胞化学、RT-PCR 、蛋白免疫印迹等多种方法检测)。

 

 

 

传代细胞培养

服务简介：

  传代培养是细胞培养常规保种方法之一，也是所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长，这一过程就叫传代。传代培养可获得大量供实验所需细胞。细胞传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细地无菌操作。

服务内容：

根据客户需求，提供多种细胞系培养，细胞系(或株)的鉴定和管理。

稳定细胞系筛选

服务简介：

  外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的蛋白，称稳定转染。建立稳定的细胞系，是指对靶细胞进行筛选，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，常用G418进行选择性筛选。

服务内容：

1.细胞传代培养、瞬时转染预实验及药物浓度筛选；

2.瞬时转染筛选；

3.多克隆细胞系构建及鉴定(RT-PCR，WB)；

4.单克隆细胞系筛选及鉴定(R下PCR，WB)。

 

细胞转染

服务简介:

    转染技术的选择对转染结果影响很大，许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例，细胞数量，培养及检测时间等。本公司主要的转染方法：脂质体转染法、电穿孔转染法、病毒感染法。

服务内容:

1.脂质体转染法

  阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。

2.电穿孔转染法

  电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。本公司针对细胞死亡研发出了一种电转保护剂， 大大的降低了细胞的死亡率，同时也提高了电穿孔转染效率。

3.病毒感染

  对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。