优点 | 缺点 | 应用 | |
大肠系统 |
· 1遗传背景清楚; · · 2.成本低,培养条件简单; · · 3.转化操作简单; · · 4.蛋白表达周期短; · · 5.高繁殖率和高表达水平; · · 6.可以选择载体和融合标签多; · · 7.可调控不同参数得到最适表达; · · 8.标签可以放在N/C端,并且带有酶切位点,容易切割。 · |
· 1.不能有效的形成二硫键和错误的折叠导致很容易产生包涵体; · · 2.蛋白表达产物缺少修饰(如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等); · · 3.包涵体复性的成功率和回收率不是很高。 · |
蛋白结构,酶活,药物原理研发; 诊断用途 。 |
酵母系统 |
· 1.低成本、表达水平高; · · 2.无自产内毒素; · · 3.有效的蛋白折叠和分泌表达; · · 4.简单的培养条件和纯化操作; · · 5.产物可翻译后修饰:糖基化、磷酸化、酰脂化具有功能的表达蛋白; · · 6.可利用简单无机盐培养基高密度发酵,生物量大; · · 7.性质较原核表达的蛋白质更加稳定,特别适合于表达真核生物基因和制备具有功能的表达蛋白; · · 8.实验室和工业操作简单。 · |
糖基化修饰和哺乳细胞仍然有差异。 | 蛋白结构,酶活,药物原理研发。 |
昆虫系统 |
· 1.繁殖速度相对较快,表达量高; · · 2.表达病毒类蛋白更具有优势; · · 3.糖基化修饰更接近于哺乳动物细胞表达; · · 4.去糖基化修饰相对容易有利于结构鉴定; · · 5.基因容量大:由于杆状病毒基因组较大,所以可携带较大的基因片段; · · 6.安全性高:杆状病毒具有严格的种属特异性,不感染脊椎动物和植物,有较高的安全性; · · 7.外源基因表达效率高:与其他真核细胞表达系统相比,杆状病毒系统可以从受感染的晚期细胞中高效地表达外源蛋白; · · 8.表达产物具有较高活性:杆状病毒将会在昆虫宿主细胞中大量扩增,而且产生的重组蛋白会进行类似哺乳动物细胞中的翻译后修饰,表达产物具有很强的生物活性; · · 9.易于扩增:杆状病毒可以大规模生产具有生物学活性的重组蛋白产品。 · |
· 1.培养基成本贵; · · 2.前肽蛋白分泌效率低; · · 3.病毒感染导致细胞裂解潜在的会降解目的蛋白; · · 4.糖基化修饰和哺乳细胞仍然有差异。 · |
蛋白结构,酶活,药物原理研发。 |
哺乳系统 |
· 1.无自产内毒素; · · 2.有效的蛋白折叠和分泌表达; · · 3.所有的翻译后修饰,提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能; · · 4.表达产物在分子结构、理化性质和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。 · |
· 1.培养基成本贵; · · 2.生长要求高。 · |
蛋白结构,酶活,药物原理研发; 诊断用途; 细胞基础研究。 |
大肠无细胞系统 |
· 1.高得率:我们提供原始的以及带有优化系列标签的pET载体,使膜蛋白的产量达到mg级; · · 2.蛋白合成表达条件可操控; · · 3.目的蛋白融合有6*His有利于纯化。 · |
· 1.有限的翻译后修饰; · · 2.放大成本贵。 · |
蛋白结构,酶活,药物原理研发; 体外克隆表达; 同位素标记蛋白应用于NMR; 插入非天然氨基酸(人工改造的特殊氨基酸)。 |